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细胞消化与解离试剂
在组织细胞的体外培养和原代细【xì】胞培养的过程中,需要使用组织细胞消【xiāo】化与解离试剂使组织细胞得以解【jiě】离和分散,以便进行单个细胞悬液的制备或贴壁生长传代细胞培养。常用的消化液有胰蛋白酶(Trypsin)-EDTA、胶原酶和分散酶等。NEST®提供服务多种效能【néng】不同的细胞消化液,以满足您在原代细胞分离和贴壁细胞传代培养中的不同需求。
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胰蛋白酶(Trypsin)是一种丝【sī】氨酸水解酶,它能够把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羟基侧切段,水解细胞间的蛋【dàn】白质,破坏【huài】细胞间的连接,从而使组织【zhī】或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细【xì】胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度调节和作用时间段有关,在pH8.0和37°C时,胰酶【méi】的作用能力最强。因此,在使用胰酶时,应当把握好浓度、温度调节和时间段,以免消化过度造成细胞损伤。一般常用胰酶的【de】工作浓度为0.25%,而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度(0.05%)的胰酶【méi】进行细胞消化。由【yóu】于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+,从而破坏细胞连接促进细胞的解离,因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用,以增强解离效果。对于EDTA可能会干扰后续的测试分析时,推荐选择不含EDTA的消化液。具体请参考以下表格【gé】选择合适的胰蛋白酶产品。

储存:-20度,干冰运输